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經(jīng)常有小伙伴說(shuō),哇,細(xì)胞怎么那么難養(yǎng)啊,比女朋友都嬌貴?。筐B(yǎng)細(xì)胞的你,在實(shí)驗(yàn)中,有沒(méi)有這樣的煩惱呢?其實(shí),在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,最基本的培養(yǎng)基真的很重要,一定要先選對(duì)合適的培養(yǎng)基,再好好開展實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞都沒(méi)有絕對(duì)最好的培養(yǎng)條件,只有更加適合,就像我們生活中找男女朋友一樣,沒(méi)有最好,只有最合適。比如在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中也很容易生長(zhǎng)??傊?,MEM是貼壁細(xì)胞最好的選擇,而 RPMI-1640是懸浮細(xì)胞培養(yǎng)一個(gè)好的選擇,當(dāng)然,這是在對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)條件不明確的時(shí)候,是好的選擇;當(dāng)培養(yǎng)條件有明確標(biāo)注的時(shí)候,就需要按照指明的來(lái)進(jìn)行,因?yàn)楹玫募?xì)胞會(huì)讓實(shí)驗(yàn)事半功倍。
下面介紹幾種在培養(yǎng)細(xì)胞起到很大影響的試劑:
酚紅:酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),也不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
L-谷氨酰胺和GlutaMAX-I:L-谷氨酰胺在脫掉氨基后可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源、多參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解,而 L-谷氨酰胺的降解會(huì)導(dǎo)致氨的形成,氨對(duì)細(xì)胞有毒性,因此敏感細(xì)胞不建議使用。 一般培養(yǎng)細(xì)胞建議使用GlutaMAX-I,因?yàn)?/span>GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。
親愛的小伙伴,你get到了嗎?下次培養(yǎng)細(xì)胞,先了解一下細(xì)胞的性質(zhì),把基礎(chǔ)的培養(yǎng)基先選對(duì)哦!
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