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人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit ,人抗淋巴細(xì)胞球蛋白ELISA Kit

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 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit ,人抗淋巴細(xì)胞球蛋白ELISA Kit 

 

一、基本信息:
中文名稱: 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit ,人抗淋巴細(xì)胞球蛋白ELISA Kit 
英文名稱:Human PA-IgG/M/A ELISA Kit
品牌:澤維爾
貨號(hào):ZWL-H00957
規(guī)格:96T/盒和48T/盒
樣本體積:50~100ul
保存溫度及有效期:2~8度下6個(gè)月,盡量保持恒溫,以免抗體失活。
用途:用于測(cè)定血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測(cè)物質(zhì)的含量。
二、產(chǎn)品圖片
 
三、試劑盒原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定樣本中待測(cè)物的水平。用已知濃度的待測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的樣品依次先后加入微孔板,先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,再與親和素標(biāo)記過的HRP結(jié)合,再經(jīng)過徹底洗滌后,加入底物A、B,底物在HRP酶的催化下產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。
四、試劑盒組成:
 
五、試劑盒的操作步驟:
 
六、實(shí)驗(yàn)操作過程中的注意點(diǎn):
1.       試劑應(yīng)按說明書要求保存,實(shí)驗(yàn)前樣本和試劑盒需室溫平行1小時(shí),如果樣本是凍存樣本,應(yīng)提前拿到2-8攝氏度進(jìn)行解凍,不建議直接室溫解凍。
2.       若樣本較少,用不完的酶標(biāo)應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免失效。
3.       在做完整個(gè)實(shí)驗(yàn)用儀器之前,儀器最好預(yù)熱半小時(shí),這個(gè)計(jì)算好時(shí)間,也可以直接將儀器一直開著,直到整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
4.       在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部,一般槍頭都懸空,可以將槍頭靠在孔邊緣,但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘留液體要看整體多少量,不要吹打下去。特別忌諱在板孔內(nèi)壁流向板孔。整個(gè)加液過程不要產(chǎn)生氣泡。(洗滌液除外)
5.       封板膜只限一次使用,避免交叉使用。
七、不同樣本的處理要求及保存溫度:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
八、在選擇試劑盒類型時(shí)需先明確以下幾點(diǎn):
1.       要檢測(cè)的是抗體還是抗原。
2.       要定量檢測(cè)還是定性檢測(cè)
3.       是否需要檢測(cè)具有特異抗體的類型
 
 

 

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