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豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒, 豬E-Selectin/CD62E

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 E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒, E-Selectin/CD62E ELISA試劑盒, E選擇素ELISA試劑盒

 

一、基本信息:

中文名稱:E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒, E-Selectin/CD62E ELISA試劑盒, E選擇素ELISA試劑盒

英文名稱:Porcine E-Selectin ELISA kit

品牌:澤維爾

貨號:ZWL-R00162

規(guī)格:96T/盒和48T/

樣本體積:50~100ul

保存溫度及有效期:2~8度下6個(gè)月,盡量保持恒溫,以免抗體失活。

用途:用于測定血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。

二、產(chǎn)品圖片

 

三、試劑盒原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心法測定樣本中待測物的水平。用已知濃度的待測物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的樣品依次先后加入微孔板,先將待測物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,再與親和素標(biāo)記過的HRP結(jié)合,再經(jīng)過徹底洗滌后,加入底物A、B,底物在HRP酶的催化下產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)的含量。

四、試劑盒組成:

 

五、試劑盒的操作步驟:

 

六、實(shí)驗(yàn)操作過程中的注意點(diǎn):

1.       試劑應(yīng)按說明書要求保存,實(shí)驗(yàn)前樣本和試劑盒室溫平行1小時(shí),如果樣本是凍存樣本,應(yīng)提前拿到2-8攝氏度進(jìn)行解凍,不建議直接室溫解凍。

2.       若樣本較少,用不完的酶標(biāo)應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免失效。

3.       在做完整個(gè)實(shí)驗(yàn)儀器之前,儀器最好預(yù)熱半小時(shí),這個(gè)計(jì)算好時(shí)間,也可以直接將儀器一直開著,直到整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

4.       在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部,一般槍頭都懸空,可以將槍頭靠在孔邊緣,但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘留液體看整體多少量,不要吹打下去。特別忌諱在孔內(nèi)壁流向孔。整個(gè)加液過程不要產(chǎn)生氣泡。(洗滌液除外)

5.       封板膜只限一次使用,避免交叉使用。

七、不同樣本的處理要求及保存溫度:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

八、在選擇試劑盒類型時(shí)需先明確以下幾點(diǎn):

1.       要檢測的是抗體還是抗原。

2.       要定量檢測還是定性檢測

3.       是否需要檢測具有特異抗體的類型

 

 

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