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人波形蛋白(VIM) ELISA試劑盒，人波形蛋白 ELISA試劑盒，人VIM ELISA試劑盒
一、基本信息：
中文名稱：人波形蛋白(VIM) ELISA試劑盒，人波形蛋白 ELISA試劑盒，人VIM ELISA試劑盒
英文名稱：Human vimentin ELISA Kit, Human VIM ELISA Kit
品牌：澤維爾
貨號(hào)：ZWL-H00024
規(guī)格：96T/盒和48T/盒
樣本體積：50~100ul
保存溫度及有效期：2~8度下6個(gè)月，盡量保持恒溫，以免抗體失活。
用途：用于測(cè)定血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測(cè)物質(zhì)的含量。
二、試劑盒原理：
本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定樣本中待測(cè)物的水平。用已知濃度的待測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的樣品依次先后加入微孔板，先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，再與親和素標(biāo)記過的HRP結(jié)合，再經(jīng)過徹底洗滌后，加入底物A、B，底物在HRP酶的催化下產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。
三、試劑盒組成：
四、試劑盒的操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
4. 溫育：用封板膜封板后置
5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，
8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
9. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
五、實(shí)驗(yàn)操作過程中的注意點(diǎn)：
1. 試劑應(yīng)按說明書要求保存，實(shí)驗(yàn)前樣本和試劑盒需室溫平行1小時(shí)，如果樣本是凍存樣本，應(yīng)提前拿到2-8攝氏度進(jìn)行解凍，不建議直接室溫解凍。
2. 若樣本較少，用不完的酶標(biāo)應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免失效。
3. 在做完整個(gè)實(shí)驗(yàn)用儀器之前，儀器最好預(yù)熱半小時(shí)，這個(gè)計(jì)算好時(shí)間，也可以直接將儀器一直開著，直到整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
4. 在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部，一般槍頭都懸空，可以將槍頭靠在孔邊緣，但槍頭尖懸空，如果槍頭上殘留液體要看整體多少量，不要吹打下去。特別忌諱在板孔內(nèi)壁流向板孔。整個(gè)加液過程不要產(chǎn)生氣泡。（洗滌液除外）
5. 封板膜只限一次使用，避免交叉使用。
六、不同樣本的處理要求及保存溫度：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
七、在選擇試劑盒類型時(shí)需先明確以下幾點(diǎn)：
1. 要檢測(cè)的是抗體還是抗原。
2. 要定量檢測(cè)還是定性檢測(cè)
3. 是否需要檢測(cè)具有特異抗體的類型
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暫無數(shù)據(jù)
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